家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细-名校题库网

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家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前，需用__________酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

(2分)

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自eDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间；若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达，可分别采用__________、__________的方法逐步鉴定。(6分)

(3)通过PCR技术可大量获取目的基因，该PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液

(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、__________和__________。(4分)

(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以__________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。(3分)

正确答案及解析

正确答案

解析

(1)胰蛋白

(2)分子杂交；抗原一抗体结合

(3)耐高温的DNA聚合酶(taq酶)；DNA引物

(4)增大表面积

解析：

(1)动物细胞培养时，因动物组织细胞聚合在一起，需要用胰蛋白酶进行处理，水解组织中的蛋白质，以便获得单个细胞。

(2)基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录，可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻译．可采用抗原一抗体杂交法。

(3)聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。采用PCR扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶(taq酶)和DNA引物。

(4)细胞增殖到一定程度，也就是互相挨在一起的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖．这种现象就叫作接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大表面积，增加培养的细胞数量．也有利于空气交换。