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科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能，将该基因导人到大肠杆菌（菌落为白色）细胞进行复制和表达，如下图。所使用的质粒中有和lacZ两种标记基因，前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力，后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。

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（1）将蜂鸟的B-球蛋白基因导人大肠杆菌，需要先用______（相同/不同）的限制性内切酶处理蜂鸟的DNA和载体质粒，在用________酶进一步处理以得到重组质粒。（6分）

（2）在将重组质粒导人大肠杆菌细胞之前，需要用_______（填物质名称）处理大肠杆菌，使之转化为能够吸收周围环境中DNA分子的__________细胞。（6分）

（3）使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌，选择________的菌落培养，就获得了导人重组质粒的大肠杆菌。（3分）

正确答案及解析

正确答案

解析

（1）将蜂鸟的β-球蛋白基因导入大肠杆菌前，需先构建基因表达载体，即先用同种限制酶处理蜂鸟的DNA和质粒，并用DNA连接酶酶进一步处理以期得到重组质粒；

（2）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca2+处理微生物细胞，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态。

（3）质粒中有ampⅡ和lacZ两种标记基因，前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力，后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。在构建基因表达载体时，ampⅡ基因完好，而lacZ基因被破坏，因此使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌，选择白色的菌落克隆培养，就获得了导入重组质粒的大肠杆菌。