消毒方法主要分为两大类，即物理方法和化学方法。

1．物理消毒法

(1)机械消毒：一般应用肥皂刷洗，流水冲净，可消除手上绝大部分甚至全部细菌，使用多层口罩可防止病原体自呼吸道排出或侵入。应用通风装置过滤器可使手术室、实验室及隔离病室的空气，保护无菌状态。

(2)热力消毒：热力消毒包括火烧、煮沸、流动蒸气、高热蒸气、干热灭菌等。能使病原体蛋白凝固变性，失去正常代谢功能。

1)适用范围：火烧适用于经济价值小的污染物，金属器械和尸体等；煮沸适用于耐煮物品及一般金属器械；压力蒸气灭菌适用于耐高温、耐高湿的医疗器械和物品的灭菌。不能用于凡士林等油类和粉剂的灭菌。

2)压力蒸气灭菌器分类：根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸气灭菌器和预真空压力蒸气灭菌器两大类。

(3)紫外线消毒：紫外线可引起细胞成分、特别是核酸、原浆蛋白核酸发生变化，导致微生物死亡。紫外线波长范围200~270nm，以250~270nm波段杀菌作用最强。

1)适用范围：适用于室内空气及一般物品表面消毒。

2)注意事项：电压、距离、温度、湿度、照射时间等因素会影响紫外线消毒效果，消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，若温度低于20℃或高于40℃，相对湿度大于60%时应适当延长照射时间以保证消毒效果；对物品表面消毒时，应以足够的照射剂量直接照射到物体表面；但不得使紫外线光源照射到人，以免引起损伤。在使用过程中，应保持紫外线灯表面的清洁，要用酒精棉球及时清除灯管表面的灰尘。

2．化学消毒法 化学消毒剂可根据其对病原体蛋白质的作用，分为凝固蛋白消毒剂，包括酚类、酸类和醇类；溶解蛋白消毒剂，主要为碱性药物，常用有氢氧化钠、石灰等；氧化蛋白类消毒剂，包括含氯消毒剂和过氧化物类消毒剂，因消毒力强，目前在防疫工作中应用最广；阳离子表面活性剂主要有季铵盐类，高浓度可凝固蛋白，低浓度抑制细菌代谢；烷基化消毒剂，包括福尔马林、戊二醛、环氧乙烷等，其作用是通过烷基化，破坏微生物的蛋白质代谢；其他类消毒剂，包括碘酒、碘伏和洗必泰等。

(1)戊二醛：戊二醛属烷基化消毒剂也是灭菌剂，具有广谱、高效、低毒、对金属腐蚀性小、受有机物影响小、稳定性好等特点。对微生物的杀灭作用主要依靠其醛基作用于菌体蛋白的巯基、羟基、羧基和氨基，可使之烷基化，引起蛋白质凝固造成细菌死亡。戊二醛的灭菌浓度为2%，主要有2%碱性戊二醛、2%强化酸性戊二醛和2%中性戊二醛。碱性戊二醛常用于医疗器械灭菌，使用前应加入适量碳酸氢钠，摇匀后，静置1h，测定pH值。pH在7.5~8.5时，戊二醛的杀菌作用最强。2%强化酸性戊二醛是以聚氧乙烯脂肪醇醚为强化剂，有增强戊二醛杀菌的作用，对细菌芽胞的杀灭作用较碱性戊二醛弱，但对病毒的灭活作用较碱性戊二醛强，稳定性较碱性戊二醛好，可连续使用28天。

1)适用范围：适用于医疗器械和耐湿忌热的精密仪器的消毒与灭菌，不宜用作皮肤、黏膜消毒。

2)消毒处理：①进行灭菌处理时用浸泡法。将清洗、晾干待灭菌处理的医疗器械及物品浸没于装有戊二醛的容器中，浸泡10h，无菌操作取出，用无菌水冲洗干净，并无菌擦干后使用；②进行消毒处理时用浸泡法，将清洗、晾干的待消毒处理的医疗器械及物品浸没于装有戊二醛的容器中，20~45min后取出后用灭菌水冲洗干净并擦干。

3)注意事项：①2%酸性戊二醛对金属有腐蚀性；2%中性戊二醛对手术刀片等碳钢制品有腐蚀性，使用前应先加入0.5%亚硝酸钠防锈；②戊二醛杀菌效果受pH影响大，用酸性或强化酸性戊二醛浸泡医疗器械时，应先用0.3%碳酸氢钠调pH7.5~8.8。pH超过9.0时，戊二醛迅速聚合则失去杀菌能力；③2%碱性戊二醛室温只可保存2周，其余剂型可保存4周；④戊二醛对皮肤黏膜有刺激性，接触溶液时应戴手套，防止溅入眼内或吸入体内；⑤配制戊二醛要用蒸馏水，盛放戊二醛溶液的容器要干净；⑥用戊二醛消毒或灭菌后的器械一定要用灭菌蒸馏水充分冲洗后再使用。

(2)过氧乙酸：过氧乙酸是广谱、速效、高效灭菌剂，能迅速杀灭病毒、细菌、真菌及芽胞。可用于各种器具及环境消毒。0.2％溶液接触10min基本可达到灭菌目的。可用于空气、环境消毒、预防消毒。过氧乙酸是强氧化剂，对金属及织物有腐蚀性，受有机物影响大，稳定性差。剂型分为为一元型和二元型。

1)适用范围：适用于耐腐蚀物品、环境等的消毒和灭菌。

2)消毒处理：常用消毒方法有浸泡、擦拭、喷洒等。影响过氧乙酸杀菌效果的主要因素有温度、湿度、浓度和作用时间及有机物的保护作用。温度越高过氧乙酸的杀菌力越强，但温度降至-20℃时，过氧乙酸仍有明显杀菌作用；当过氧乙酸喷雾消毒时，空气的相对湿度在20％~80%时，湿度越大，杀菌效果越好。当相对湿度低于20%时，则杀菌效果较差；过氧乙酸浓度越高、作用时间越长杀菌作用越强。在用过氧乙酸消毒时，有机物对细菌繁殖体的保护作用较为明显，但是这种保护作用因菌种和有机物的种类及浓度的不同而有所不同。

a．浸泡法：对一般污染物品的消毒，用0.05%的过氧乙酸；对细菌芽胞污染物品的消毒用1%的过氧乙酸浸泡5min，灭菌时，浸泡30min。待消毒的物品放入装有过氧乙酸的容器中要加盖。达到规定的时间后取出用无菌蒸馏水冲洗干净并擦干。

b．擦拭法：对不能用浸泡法消毒的物品采用擦拭法消毒。对物体表面进行消毒，可用浓度为0.2%~1％的过氧乙酸溶液，擦拭后保持30min。

c．喷洒法：对一般污染表面的消毒，用0.2%~0.4％过氧乙酸喷洒，作用为30~60min。

3)注意事项：①过氧乙酸不稳定，应贮存在通风阴凉处，用前应测定有效含量，原液浓度低于12%时禁止使用；②稀释时不能把浓度为15%~20％的原液当成100%的原液进行稀释；③二元型过氧乙酸，在使用前按1：1的比例进行配制，在常温下放置24h后才能使用。稀释液临用前配制，当天使用；④由于原液为强氧化剂，具有较强的腐蚀性，配制溶液时应戴橡胶手套，防止药液溅到皮肤上。如药液不慎溅入眼中或皮肤上，应立即用大量清水冲洗；⑤过氧乙酸对金属有腐蚀性，对织物有漂白的作用。金属制品与织物经浸泡消毒后，立即用清水冲洗干净。

(3)二氧化氯：二氧化氯具有广谱、高效、速效杀菌作用，属高效消毒剂，二氧化氯具有极强的氧化能力，对织物有漂白作用，对金属有腐蚀性，消毒效果受有机物影响很大，二氧化氯活性液和稀释液不稳定。

1)适用范围：适用于医疗卫生、生活饮用水、食品加工及环境等方面的消毒。

2)消毒处理消毒液配制：包括两个步骤，一是活化即在非金属容器中加一定量的水，再把消毒粉剂加入，搅拌均匀，静置5~10min，即为原液。二是根据有效含量用水将二氧化氯稀释成所需浓度。常用消毒方法有浸泡、擦拭、喷洒等。

a．浸泡法：依处理对象不同确定所需的消毒液浓度。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用100~250mg/L二氧化氯溶液浸泡30min；对肝炎病毒和结核分枝杆菌污染物品的消毒，用500mg/L二氧化氯浸泡30min；对细菌芽胞污染物品的消毒，用1000mg/L二氧化氯浸泡30min。将清洗、晾干的待消毒或灭菌物品浸没于装有二氧化氯溶液的容器中，加盖。

b．擦拭法：对不能用浸泡法消毒的物品采用擦拭法消毒。消毒所有药物浓度和作用时间视处理对象需要而定。

c．喷洒法：对一般污染的表面，用500mg/L二氧化氯均匀喷洒，作用30min；对肝炎病毒和结核分枝杆菌污染的表面，用1000mg/L二氧化氯均匀喷洒，作用60min。

d．饮水消毒：在饮用水源的水中加入5mg/L的二氧化氯，作用5min，使大肠杆菌数达到饮用水卫生标准。

3)注意事项：①配制溶液时，先放水再加粉剂，次序不能颠倒；②消毒剂应现用现配，稀释宜用塑料、玻璃等非金属容器；③高浓度二氧化氯具有漂白性，避免接触衣物和皮肤。若不慎接触人体立即用清水冲洗；④二氧化氯对金属有腐蚀性，金属制品经二氧化氯消毒后，应迅速用清水冲洗干净并沥干。

(4)含氯消毒剂：含氯消毒剂是指溶于水后产生具有杀灭微生物活性的次氯酸的消毒剂，其有效成分常以有效氯表示。含氯消毒剂具有广谱、高效、低毒的特点，属高效消毒剂，对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，消毒液不稳定，有强烈的刺激性气味。酸碱度、温度、有机物是影响消毒效果的主要因素。pH值越低，消毒效果越好，pH升至8以上，可失去杀菌活性。温度越高，杀灭微生物的作用越强；当有机物（如血液、唾液和排泄物）存在时，消毒效果明显下降，此时应加大消毒剂使用浓度，或延长作用时间。常用的含氯消毒剂有漂白粉：含有效氯25%(W/W)；漂白粉精：含有效氯80%(W／W)；次氯酸钠，工业制备的含有效氯10%(W/W)；二氯异氰尿酸钠，含有效氯60%(W/W)；三氯异氰尿酸，含有效氯85%~90%(W/W)；氯化磷酸三钠，含有效氯2.6%(W/W)等。

1)适用范围：适用于餐（茶）具、环境、水、疫源地等消毒。

2)消毒处理：根据处理对象对效氯含量的要求，用蒸馏水将含氯消毒剂配制成所需浓度溶液。采用浸泡、擦拭、喷洒与干粉消毒等方法进行消毒处理。

a．浸泡法：对细菌繁殖体污染的物品的消毒，用含有效氯500mg/L的消毒液浸泡10min以上；对经血传播病原体、分枝杆菌和细菌芽胞污染物品的消毒，用含有效氯2000~5000mg/L消毒液浸泡30min以上。待消毒的物品放入装有含氯消毒剂溶液的容器中要加盖。

b．擦拭法：对不能用浸泡法消毒的物品用擦拭法消毒。消毒所有药物浓度和作用时间视处理对象不同进行选择。

c．喷洒法：对一般污染的物品表面，用1000mg/L的消毒液均匀喷洒，作用30min以上；对经血传播病原体、结核杆菌等污染表面的消毒，用含有效氯2000mg/L的消毒液均匀喷洒，作用60min以上。喷洒后人员应离开现场。

d．干粉消毒法：对排泄物的消毒，用含氯消毒剂干粉加入排泄物中，使含有效氯10000mg/L，略加搅拌后，作用2~6h，对医院污水的消毒，用干粉按有效氯50mg/L用量加入污水中，并搅拌均匀，作用2h后排放。

3)注意事项：①应置于阴凉处避光、防潮、密封保存；所需溶液应现配现用；②配制漂白粉等粉剂溶液时，应戴口罩，橡胶手套；③对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒；④含氯消毒剂对金属有腐蚀性，不应做金属器械的消毒；加防锈剂的含氯消毒剂对金属器械消毒后，应用无菌蒸馏水冲洗干净，并擦干后使用；⑤用于消毒餐具，要用清水冲洗干净；⑥处理对象若存在大量有机物时，应提高消毒剂的使用浓度或延长作用时间；⑦对污水进行消毒时，应根据污水中还原性物质含量适当增加浓度。

(5)碘伏：碘伏是碘与表面活性剂的不定型结合物。碘伏属中效消毒剂，低毒、对皮肤黏膜无刺激、对二价金属有腐蚀性、受有机物影响很大、稳定性好等特点。影响碘伏消毒效果的主要因素有温度、pH值、有机物及游离碘浓度。一般情况下，随着温度的升高加速游离碘的释放，提高杀菌效果；溶液呈酸性时，可加速游离碘的释放而增强杀菌效果，在碱性介质里，由于碘发生歧化反应，使游离碘的含量降低而减弱杀菌作用；消毒物品表面有血迹会影响消毒效果；在临床实际消毒过程中，碘溶液浓度并非越高越好，常用浓度为含有效碘0.5%。

1)适用范围：适用于皮肤、黏膜等的消毒。

2)消毒处理：根据有效碘含量用灭菌蒸馏水将碘伏稀释成所需浓度。常用消毒方法有浸泡、擦拭、冲洗等方法。

a．浸泡法：对细菌繁殖体污染物品的消毒时，消毒液的有效碘含量为500mg/L，将清洗、晾干的待消毒物品浸没于装有碘伏溶液的容器中，加盖，浸泡30min。

b．擦拭法：对皮肤、黏膜消毒时用擦拭法。用浸有碘伏消毒液的无菌棉球或其他替代物品擦拭被消毒部位。外科洗手用含有效碘2500~5000mg/L的消毒液擦拭作用3min。手术部位及注射部位的皮肤消毒，用含有效碘2500~5000mg/L的消毒液局部擦拭2遍，作用2min；口腔黏膜及创口黏膜创面消毒，用含有效碘500~1000mg/L的消毒液擦拭，作用3～5min。注射部位消毒可用市售有效碘含量为2000mg/L的碘伏棉签擦拭，作用2～3min。

c．冲洗法。对阴道黏膜及伤口黏膜创面进行消毒时，用含有效碘250mg/L的消毒液冲洗3～5min。

3)注意事项：①碘伏应于阴凉处避光、防潮、密封保存；②碘伏对二价金属有腐蚀性，不能用于金属制品的消毒；③禁止与红汞等拮抗药物同用；④消毒时，若存在有机物，应提高药物浓度或延长消毒时间，以保证消毒效果。

(6)乙醇：乙醇属于中效消毒剂，杀菌作用较快，消毒效果可靠，无毒，对金属无腐蚀性，对皮肤黏膜有刺激性、易挥发。市售商品乙醇浓度大于95%(V/V)。

1)适用范围：用于皮肤消毒以及临床医疗器械的消毒等。

2)消毒处理：消毒液配制：根据待处理对象对乙醇含量的要求，用灭菌蒸馏水将乙醇稀释成所需浓度。常用消毒方法有浸泡法和擦拭法：①浸泡法：对细菌繁殖体污染的医疗器械等物品的消毒，用75%的乙醇溶液浸泡10min以上；②擦拭法：皮肤的消毒用75%乙醇棉球擦拭。